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巨球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2024-08-27
點擊次數:
856
產品特點:
巨球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
  50次巨球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

樣品RNA的抽提:
產品僅用于科研取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1)紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。

 產品名稱

巨球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

 英文名稱

 Macrococcus spp.

 貨號

 YSP96895

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

熒光定量PCR試劑盒技術:
本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設有限位凸起,下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋,側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設有環形凸起,兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內部設有固定桿,固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
雙(氟基)砜(>99.0%(GC))甲氧基吲哚-2-羧酸

二砜-3,3'-二磺酸二鈉鹽(>95.0%(T))-6-氨基喹啉

雙(基)砜(>98.0%(N))甲氧基喹啉

3,3',4,4'-二基砜四羧酸二酸酐(>97.0%(HPLC)(T))-5-甲氧基吡啶

二基砜-4,4'-二-3,3'-二磺酸二鈉(>98.0%(HPLC)(T))喹啉

3,7-二氨基-2,8-二甲基二并噻吩砜(含2,6-二甲基異構體)(>70.0%(HPLC))羥基喹啉

2,2-雙(羥基)丁烷(>98.0%(GC))基-甲基吡啶

2,2'-雙(氧基)烷(>98.0%(N))2-氟基溴

2,2-雙(酰氧基基)烷(>98.0%(GC))氨基-溴喹啉

2,2-雙(甲酰氧基)烷(>97.0%(GC)(T))溴吡唑并[1,5-A]吡啶

2,2-雙(羥基-3,5-二基)烷(>98.0%(GC))2,3,5-三-4,6-二氟吡啶

2,2-雙[(氨氧基)基]烷(>98.0%(HPLC)(T))4,6-二喹啉

α,α'-雙(氨基基)-1,二異基(>98.0%(GC))4,6-二羥基喹啉

α,α'-雙(羥基基)-1,二異基(>98.0%(GC))4,6-二溴喹啉

雙酚 C(>98.0%(GC))4,7-二喹啉

2,2-雙(環氧氧基基)烷(>85.0%(GC))4,7-二羥基喹啉

α,α'-雙(羥基-3,5-二甲基)-1,二異(>98.0%(GC))4,7-二溴喹啉

2,2-雙(環己基-羥基)烷(>98.0%(HPLC))2-基煙酸
巨球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒癌基因c-Raf抗體MRAS/Mras/FITC  熒光素標記原癌基因M-ras抗體IgG100 ul

Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體Mre11/HNGS1/FITC  熒光素標記DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體IgG100 ul

黑色素瘤相關抗原抗體Phospho-Mre11 (Ser676)/FITC  熒光素標記酸化DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體IgG100µl

CD33抗體MRP1/FITC  熒光素標記多藥耐藥相關蛋白1抗體IgG300 ul

睫狀神經營養因子受體α抗體CID1/ABCC1/FITC  熒光素標記結合轉化激活因子CID1抗體IgG100 ul

CD7抗體MRP2/FITC  熒光素標記多藥耐藥相關蛋白2抗體20 ul

尾型同源盒轉錄因子2抗體MRP3/FITC  熒光素標記多藥耐藥相關蛋白3抗體IgG100 ul

CD68抗體MRP4/ABCC4 /FITC  熒光素標記多藥耐藥相關蛋白4抗體IgG100 ul

緊密連接蛋白1抗體MRP5/ABCC5/FITC  熒光素標記多藥耐藥相關蛋白5抗體IgG100 ul

 

產品相關關鍵字: 巨球菌 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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