客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR試劑盒技術：
產品僅用于科研本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設有限位凸起，下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋，側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設有環形凸起，兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內部設有固定桿，固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
樣品RNA的抽提：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1）紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為：A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。
3,二甲氧基肉桂酸(標準品)NF-κB1 p105 Antibody2-乙基酸

頭孢地鈉NF-κB1 p105 Antibody托可索侖

頭孢地尼Aurora A/AIK (1G4) Rabbit mAb聚乙吡咯烷酮

Boc-D-谷氨酰Aurora A/AIK (1G4) Rabbit mAb羧甲基纖維素

赤霉素A4+7Snail (SN9H2) Rat mAb鄰氨基噻吩(2鹽酸)

Alectinib；CH54248024F2hc/CD98 (D3F9D) XP® Rabbit mAb雙三氟磺酰亞鋰

對甲氧基肉桂酸TRAF2 (C192) Antibody殼聚糖

5-羥基色鹽酸鹽,血清鹽酸鹽TRAF2 (C192) Antibody2,二氯-7H吡咯[2,D]嘧啶

巨大戟(標準品)p48 Primase (8G10) Rat mAb2-氟-6-甲酸

阿糖尿苷;1-β-D-阿糖呋喃脲嘧啶p58 Primase (8D3) Rat mAb2-基丁酸

β-香樹素(標準品)c-Rel Antibody甲基傘形酮

頭孢磺啶鈉c-Rel Antibody6-HYDROXY-PYRIDINEBORONIC ACID

鄰二甲β2-Chimerin (2E3) Rat mAb氯-5-氟甲

醋酸美倫孕酮; 甲雌乙酸酯TRAF3 Antibody鷹爪豆

膽固酯酶;膽甾酯酶TRAF3 Antibody鄰氨基聯

1,9-吡唑并蒽酮;SP600125Pim-2 (D1D2) Rabbit mAb蒽酮

別隱品;A-別隱品(標準品) Pim-2 (D1D2) Rabbit mAb(S)-疏基吡咯烷-1-基)亞乙基氨酸對硝基芐酯

LGD-4033 ORC1 (7A7) Rat mAb3,4,5-*氧基肉桂酸
馬鼻炎病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒魚膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒Apo-E/FITC  熒光素標記載脂蛋白E抗體IgG20 ul

魚催素(PRL/LTH)ELISA試劑盒ApoH/FITC  熒光素標記載脂蛋白H抗體IgG300 ul

魚促腎上腺皮質激素(ACTH)ELISA試劑盒Apollon/FITC  熒光素標記Apollon凋亡抑制蛋白抗體IgG100 ul

魚促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒APP/FITC  熒光素標記APP淀粉樣肽前體蛋白抗體IgG100 ul

魚雌二(E2)ELISA試劑盒phospho-APP(phospho Thr668) /FITC  熒光素標記兔抗、大、APP淀粉樣肽前體蛋白（p-APP Thr668）抗體IgG100 ul

魚超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒APP695/770 /FITC  熒光素標記淀粉樣肽前體蛋白抗體IgG100 ul

魚補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒APPL1/FITC  熒光素標記抗銜接因子蛋白含pH域酸酪氨酸結合域和亮氨酸拉鏈基元1抗體IgG100µl

魚補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒APS/FITC  熒光素標記兔抗、大、APS抗體IgG100 ul

魚胞漿型脂酶A2A(cPLA2A)ELISA試劑盒APS(Ser598)/FITC  熒光素標記酸化APS抗體IgG100 ul
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。