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弗朗西斯菌通用PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2020-11-09
點擊次數:
735
產品特點:
弗朗西斯菌通用PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
  50T弗朗西斯菌通用PCR檢測試劑盒說明書的詳細資料:

服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱

弗朗西斯菌通用PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Francisella spp.PCR

 貨號

 HE31005-R

實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

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特點優勢:
    1.   特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
    2.   重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
四乙基氯化銨/氯化四乙銨/ N,N,N-三乙基乙銨氯化物/氯化四乙基銨/四乙銨化氯/TEAC 質量規格:1000μg/ml 包裝;25g

四乙基化銨/化四乙銨/ N,N,N-三乙基乙銨化物/化四乙基銨/Tetraethylammonium iodide 質量規格:1000μg/ml 包裝;500g

四甲基溴化銨/溴化四甲基銨/四甲替溴化銨/溴化四甲銨/四溴化物/TMAB 質量規格:500mg/L,溶劑: 包裝;1g

四甲基氯化銨/氯化四甲基銨/氯化四甲銨/TMAC 質量規格:1000mg/L,基體: 包裝;5g

四甲基化銨/化四甲基銨/N,N,N-*基-1-甲銨化物/化四甲銨/Tetramethylammonium iodide 質量規格:1000μg/ml 包裝;5MG

四丁基氫氧化銨/三丁基-1-丁銨氫氧化物/氫氧化四丁基銨/N,N,N-三丁基-1-丁銨氫氧化物/Tetrabutyl ammonium hydroxide 質量規格:1000μg/ml 包裝;1g

四正丁基氯化銨/N,N,N-三丁基-1-丁銨氯化物/四丁基氯化銨/氯化四丁銨/氯化四丁基銨/氯化四正丁基銨/TBAC 質量規格:1000μg/ml 包裝;5g

四正丁基化銨/四丁基化銨/化四丁銨/N,N,N-三丁基-1-丁銨化物/TBAI 質量規格:1000µg/mL,基體:10%HCl 包裝;1g

鉬酸銨/四合鉬酸銨/鉬酸銨四合物/七鉬酸銨/仲鉬酸銨/Ammonium molybdate tetrahydrate 質量規格:1000μg/ml,溶劑:1.0Mol/L HNO3 包裝;25g

磷酸烯醇酸單環己銨鹽/磷酸烯醇酸單環己胺鹽/磷酸稀醇單環已銨鹽/磷酸烯醇酸/2-(膦酰氧基)酸環己胺鹽/磷酸酸一環己銨鹽/PEP 質量規格:1000µg/mL,基體:10%HCL 包裝;5g

磷酸烯醇酸單鉀鹽/磷酸稀醇酸單鉀鹽/磷酸烯醇酸酯一鉀/磷酸烯醇式酸單鉀鹽/PEP-K 質量規格:1000μg/ml,介質:1.0mol/L 硝酸 包裝;100g

磷酸烯醇酸三環已胺鹽/磷酸烯醇酸三環己胺鹽/磷酸烯醇酸三(環已胺)鹽/PEP-TRI/PEP-3CHA 質量規格:1000mg/L,溶劑:5%鹽酸 包裝;25g

碳酸銨/碳酸銨和氨基甲酸銨混合物/Ammonium carbonate 質量規格:500mg/L,溶劑:1%鹽酸 包裝;5g

磷酸二氫銨/一鹽基磷酸銨/磷酸一銨/磷銨/磷酸二氫氨/Ammonium dihydrogen phosphate 質量規格:100μg/mL(20°C),基體:5%HCl 包裝;1g

磷酸氫二銨/二堿式磷酸銨/二鹽基磷酸銨/磷酸二銨/磷酸氫銨/Ammonium hydrogen phosphate 質量規格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L 硝酸 包裝;5g

磷酸銨/合磷酸三銨/三鹽基磷酸銨/正磷酸銨/Triammonium phosphate trihydrate 質量規格:100mg/L(20℃),基體:1%HCl 包裝;100g

檸檬酸銨/枸櫞酸銨/檸檬三銨/檸檬酸三銨/Triammonium citrate 質量規格:100µg/mL,,基體:1%HNO3 包裝;25g
弗朗西斯菌通用PCR檢測試劑盒說明書Rhizobium│soli 中文名稱:土壤根瘤菌種屬:Rhizobium│soli分離基物:樣/CTD表層樣提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:產酶微生物/產過氧化氫酶;未檢測到蛋白酶、瓊膠酶、淀粉酶和纖維素酶活性培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98%

Sphingopyxis│chilensis 中文名稱:智利含鞘氨醇盒菌種屬:Sphingopyxis│chilensis分離基物:樣/CTD表層樣提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產酶微生物/產過氧化氫酶;未檢測到蛋白酶、瓊膠酶、淀粉酶和纖維素酶活性培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98%

Amphritea│atlantica 中文名稱:大西洋美女神菌種屬:Amphritea│atlantica分離基物:樣/CTD表層樣提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產酶微生物/產過氧化氫酶;未檢測到蛋白酶、瓊膠酶、淀粉酶和纖維素酶活性培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97%

Fictibacillus│rigui 中文名稱:井假芽胞桿菌種屬:Fictibacillus│rigui分離基物:沉積物/箱式沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:產酶微生物/產酪蛋白酶、淀粉酶、過氧化氫酶;未檢測到果膠酶、纖維素酶、瓊脂酶培養方法培養基:471生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97%

Kocuria│marina 中文名稱:海考克氏菌種屬:Kocuria│marina分離基物:樣/CTD表層樣提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產酶微生物/產過氧化氫酶和淀粉酶活性;未檢測到瓊膠酶、蛋白酶和纖維素酶活性培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97%

Zhihengliuella│aestuarii 中文名稱:潮灘劉志恒菌種屬:Zhihengliuella│aestuarii分離基物:樣/CTD表層樣提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產酶微生物/產過氧化氫酶和蛋白酶;未檢測到瓊膠酶、淀粉酶和纖維素酶活性培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:20-40目

Acinetobacter│nosocomialis 中文名稱:不動桿菌(加詞待譯)種屬:Acinetobacter│nosocomialis分離基物:沉積物/多管沉積物(0-5cm)提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:大洋細菌培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:95% (HPLC)

Marichromatium│sp. 中文名稱:海洋著色菌種屬:Marichromatium│sp.分離基物:樣/下表層海提供形式:其它安全等級:1模式菌株:no應用領域:硫循環培養方法培養基:1004生長條件:25-35℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98%

 

產品相關關鍵字: 弗朗西斯菌通用 PCR檢測試劑盒 50T
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