產品名稱:三代蟲PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Gyrodactylus salarisPCR 編號:HE31041-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
? 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 苯酞/鄰羥甲基苯甲酸內酯/苯甲醇(鄰)酸內酯/苯并[C]呋喃-2-酮/2-苯并(C)呋喃酮/2-苯并呋喃酮;鄰苯二甲內酯/酞內酯/Phthalide 質量規格:>98.0%(GC)(T) 包裝;5g 合萜品/萜品/1,8-萜二醇/P-薄荷玩-1,8-二醇單/反式-4-(1-羥基-1-甲基乙基)-1-甲基環己-1-醇/p-Menthane-1,8-diol monohydrate 質量規格:>98.0%(T) 包裝;25g 薄荷腦/(-)-薄荷醇/L-薄荷醇/天然薄荷腦/1R-(1α,2β,5α)]-5-甲基-2-(1-甲基乙基)環己醇/L-孟醇/(1R,2S,5R)-2-異丙基-5-甲基環己醇/薄荷冰/對烷-3-醇/萜醇-[3]/Menthol 質量規格:>95.0%(GC)(T) 包裝;5g 茴香腦/茴香樟腦/對基茴香醚/1-甲氧基-4-基苯/反式1-甲氧基-4-(1-基)苯/4-基苯甲醚/4-基茴香醚/茴香烯/(E)-1-甲氧基-4-(1-基)苯/茴腦/大茴香腦/trans-Anethole 質量規格:>98.0%(GC) 包裝;100g 福氏*佐劑/弗氏*佐劑/FCA 質量規格:>95.0%(GC) 包裝;25g 福氏不*佐劑/弗氏不*佐劑/FICA 質量規格:>98.0%(GC) 包裝;5g 氯甲酸-2,2,2-三氯乙酯/2,2,2-三氯甲酸酯/2,2,2-三氯乙氧基羰基氯/2,2,2-三氯乙基氯甲酸酯/三氯乙氧基甲酰氯/2,2,2-三氯/2,2,2-三氯乙烯基甲酸酯/氯甲酸三氯乙酯/2,2,2-三氯乙基氯甲酯/2,2,2-Trichloroethyl chloroformate 質量規格:>98.0%(GC)(T) 包裝;100g 章魚堿/(+)-章肉堿/真蛸堿/(+)-Octopine 質量規格:>99.0%(GC)(T) 包裝;25g 2,2-二羥甲基丁酸/二羥甲基丁酸/2,2-雙(羥甲基)丁酸/雙羥甲基丁酸/DMBA 質量規格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;5g 對稱二苯基偶氮羰酰肼/二苯基卡巴腙/對稱苯肼羰偶氮苯/對稱二苯基偶氮羰肼/二苯基縮(對稱)二氨基脲/二苯偶氮碳酰肼/1,5-二苯基縮二氨基脲/二苯卡巴腙/二苯縮氨脲/苯基富馬酸/Diphenylcarbazone 質量規格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;1g 石膽酸/3-羥基膽基酸/石膽甾酸/膽石酸/Lithocholic acid 質量規格:>98.0%(T) 包裝;5g DL-α-硫辛酸/α-硫辛酸/DL-硫辛酸/1,2-二硫戊環-3-戊酸/DL-6,8-二硫代辛酸/α-硫脂酸/二硫辛酸/ DL-6,8-硫辛酸/α-類脂酸/脂酮酸/DL-Thioctic acid 質量規格:>95.0%(T) 包裝;1g 5-溴尿嘧啶/5-溴代嘧啶/5-溴-2,4(1H,3H)嘧啶二酮/5-溴脲嘧啶/5-溴-2,4-二羥基嘧啶/5-溴代由雪/5-溴代尿嘧啶/5-Bromouracil 質量規格:含氮量:23.50-24.30 % 包裝;5g 叔丁醇鈉/第三丁氧基鈉/NatB 質量規格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;250mg 叔丁醇鉀/第三丁氧基鉀/次丁氧基鉀/KtB 質量規格:>95.0%(HPLC)(T) 包裝;1g 亞磷酸二乙酯/二乙基亞磷酸酯/O,O′-二乙基亞磷酸酯/Diethyl phosphite 質量規格:>98.0%(HPLC) 包裝;5g 原丙酸三乙酯/1,1,1-三乙氧基丙烷/原丙酸乙酯/三乙氧基丙烷/鄰丙酸*酯/三乙基丙酸/Triethyl orthopropionate 質量規格:>98.0%(HPLC) 包裝;100g 三代蟲PCR檢測試劑盒說明書Bacillus│alveayuensis 中文名稱:香魚海槽芽孢桿菌種屬:Bacillus│alveayuensis分離基物:樣/上層溫泉提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:微生物/高溫菌(60℃)培養方法培養基:471生長條件:60℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Thermonema│rossianum 中文名稱:羅氏棲熱線菌種屬:Thermonema│rossianum分離基物:樣/上層溫泉提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:微生物/高溫菌(70℃)培養方法培養基:471生長條件:70℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Bacillus│aerius 中文名稱:空氣芽孢桿菌種屬:Bacillus│aerius分離基物:樣/上層溫泉提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:微生物/高溫菌(60℃)培養方法培養基:471生長條件:60℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97% Bacillus│vietnamensis 中文名稱:越南芽胞桿菌種屬:Bacillus│vietnamensis分離基物:樣/上層海提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:微生物/耐熱菌培養方法培養基:471生長條件:40℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97% Bacillus│plakortidis 中文名稱:海綿芽孢桿菌種屬:Bacillus│plakortidis分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:潛在的有機污染物降解菌/分離自草甘膦富集菌群培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97% Paenibacillus│massiliensis 中文名稱:馬賽類芽孢桿菌種屬:Paenibacillus│massiliensis分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:潛在的有機污染物降解菌/分離自草甘膦富集菌群培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97% Nesterenkonia│jeotgali 中文名稱:腌海鮮涅斯捷連科氏菌種屬:Nesterenkonia│jeotgali分離基物:樣/深層海提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:1.海洋石油污染生物修復; 2.生物活性物質篩選培養方法培養基:821生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97% Muricauda│aquimarina 中文名稱:海鼠尾菌種屬:Muricauda│aquimarina分離基物:樣/上層海提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:1.海洋石油污染生物修復; 2.生物活性物質篩選培養方法培養基:821生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99% |