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PCR核酸檢測試劑盒的檢驗原理是什么?

點擊次數:987 更新時間:2019-02-20
 
 PCR核酸檢測試劑盒的檢驗原理:  
    PCR核酸檢測試劑盒選取EB病毒基因組BamH1W基因設計特異性引物和探針,在樣本DNA核酸純化之后采用熒光PCR對病毒DNA進行檢測。  
    PCR核酸檢測試劑盒采用煮沸裂解法提取病毒DNA模板,然后在Taq酶的作用下對  
    靶區域進行擴增,同時利用Taqman熒光探針技術實時監測擴增產物的累積。Taqman探針帶有一個熒光發光基團和一個熒光淬滅基團,完整的探針在特定光源激發下,發光基團所產生的熒光被淬滅基團全部吸收,樣品無熒光。PCR過程中,Taq酶在延伸DNA鏈的同時,可通過自身的5’→3’核酸外切酶活性降解與模板結合的特異性熒光探針,使熒光報告基團與淬滅基團分離,分離后的熒光報告基團在特定光源激發下產生熒光。通過監測整個PCR過程熒光信號的變化,對未知模板進行定性分析。  
    同時PCR核酸檢測試劑盒采用內標質控體系,用于監測反應體系可能存在的抑制因素。內標模板與靶基因無同源性,內標探針選擇的是與靶基因探針沒有沖突的另一檢測通道。  
    注:1)不同批號試劑盒中各組分不可以互換。  
    2)PCR核酸檢測試劑盒以外必需的設備及材料:試劑盒以外必需的設備及材料:熒光定量PCR儀、旋渦混合器、生物安全柜、迷你離心機、干式恒溫儀或水浴鍋、移液器及無菌吸頭、離心機及無菌離心管、PCR反應管、無粉乳膠手套。  
 
 
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