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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒樣品的稀釋檢測范圍

點擊次數(shù):897 更新時間:2019-02-01
 
     elisa酶聯(lián)免疫試劑盒樣品的稀釋檢測范圍
  1.根據(jù)樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B(50:1)配制適量BCA工作液,充分混勻。BCA工作液室溫下24小時內(nèi)穩(wěn)定。
  2.*溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,取C液10微升稀釋至100微升,使終濃度為0.5mg/mL。原則上,蛋白樣品在什么溶液中,標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用什么溶液稀釋。但我們強烈建議使用三蒸水稀釋標(biāo)準(zhǔn)品及樣品。
  3.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度范圍應(yīng)在20-2000μg/mL之間。建議使用倍比稀釋法;建議取4~6個不同的濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線;建議每個濃度做2~3個復(fù)孔。
  4.蛋白樣品的稀釋:將待測蛋白樣品稀釋到標(biāo)準(zhǔn)曲線所能檢測的范圍內(nèi)。在eppendorf管中對待測蛋白進行稀釋,混勻。可用溶解蛋白的液體進行稀釋,但我們建議使用三蒸水稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
  5.在96孔板各孔中加入200μLBCA工作液,再在每孔中分別加入已稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品和蛋白樣品各20μL,建議標(biāo)準(zhǔn)品做2~3個復(fù)孔。37℃放置30分鐘。
  6.測定A562nm處的吸光度值,540-595nm之間的波長也可接受。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出蛋白濃度。
  elisa酶聯(lián)免疫試劑盒的實驗質(zhì)量控制
  (1)確定控制的對象;
  (2)規(guī)定控制對象的標(biāo)準(zhǔn)(預(yù)期值);
  (3)制定或選擇控制方法和手段;
  (4)測量實際數(shù)據(jù);
  (5)比較或較對實際數(shù)據(jù)與預(yù)期值之間的差異,并說明產(chǎn)生這一差異的原因。超出預(yù)定誤差范圍,報警系發(fā)出信號,反饋通道中斷。
  (6)采取行動,解決差異。恢復(fù)原狀(原標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài))的手段發(fā)揮作用。質(zhì)量控制主要采用質(zhì)控圖進行。質(zhì)控圖是把某一檢驗的性能數(shù)據(jù)與所計算出來的預(yù)期的"控制限"進行比較的圖。這種性能數(shù)據(jù)是在按規(guī)程正常進行時,按時間順序而抽選出來的,其目的是檢測檢驗過程中變異的"可追查"性原因。"可追逆"性的誤差原因,是指除去隨機誤差以外的其他原因。"控制限"是通過統(tǒng)計計算出來的。
  
 
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