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pcr與核酸檢測是怎么區別的?pcr核酸檢測試劑盒的檢驗原理又怎么樣

點擊次數:1445 更新時間:2019-01-18
 
   pcr與核酸檢測是怎么區別的?pcr核酸檢測試劑盒的檢驗原理又怎么樣
  聚合酶鏈式反應簡稱PCR(PolymeraseChainReaction)(又稱:多聚酶鏈式反應)PCR是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火(復性)及適溫延伸等反應組成一個周期,循環進行,使目的DNA得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。它不僅可用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎研究,還可用于疾病的診斷或任何有DNA,RNA的地方。PCR又稱無細胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增技術。
  1、核酸檢測是要對核酸序列進行測序的方法,可以使用核酸分析儀進行分析。核酸分析儀包括一個電泳系統、一個激光激發系統、一個熒光檢測系統、一臺電腦圖像、數據處理機及一臺彩色激光打印機。采用四種不同的熒光素來代替傳統的同位素測序檢測。這四種互不相關、具有各自特異的激發和發射波長約熒光素標記的引物。可分別用于雙脫氧法DNA合成的四組反應中,反應產物可以混合后在凝膠的單條泳道上完成整個測序反應。2、而PCR,中文譯為聚合酶鏈式反應,其實是一種DNA的快速擴增技術,其擴增效率之高就象核裂變的“鏈式反應”那樣。PCR技術通過兩個短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用,可以在3個小時內把特定的DNA量提高1000萬倍。比如說在“DNA指紋”中我們提到,科學家們只需要一根頭發甚至一個細胞就可以完成DNA指紋的鑒定工作,這里實際上就要采用PCR技術,因為一個細胞中的DNA含量實在太少了,人們根本不可能檢測到它的指紋;有了PCR技術就好辦了,通過PCR技術把這個細胞中的DNA片斷擴增1000萬倍,這樣DNA量就足夠作指紋鑒定了。
  pcr核酸檢測試劑盒產品特點:
  高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
  高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
  操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
  高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
  需要注意什么:
  pcr核酸檢測試劑盒反應液請在冰中配制,然后置于PCR反應儀上進行PCR反應。這種冷啟動法(CoolStartMethod)與熱啟動法(HotStartMethod)相結合,更能有效地減少PCR過程中的非特異性反應,增強PCR擴增的特異性,能得到良好的PCR結果。
  pcr核酸檢測試劑盒的檢驗原理
  本試劑盒基于熒光PCR的原理結合一步RT-PCR以及Taqman熒光探針技術,采用四色熒光PCR在全封閉的擴增體系中檢測腸道病毒EV,EV71和CA16的特異性基因片段,從而實現對樣本的多重快速檢測。同時在體系中檢測內參基因,對待測樣本的RNA提取及擴增進行全程監控,可以防止假陰性的出現。
  本試劑盒采用磁珠離心法進行核酸純化,在高鹽離子濃度下,基于磁珠表面修飾基團與核酸的特異結合原理進行總核酸的吸附分離,后穩定的回收核酸進行后續PCR擴增。
  
 
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